CONTRACT CEEX 11 "Liposan" - TEHNOLOGII DE OBTINERE A UNOR BIOPREPARATE CU ACTIVITATE LIPOLITICA PRIN BIOSINTEZA SI PRELUCRAREA UNOR PLANTE MEDICINALE INDIGENE
COORDONATOR: INSTITUTUL NATIONAL DE CERCETARE DEZVOLTARE PENTRU STIINTE BIOLOGICE cu sediul în BUCURESTI, Splaiul Independentei, nr. 296, cod postal 060031, CP 17-16, telefon 2213567, 2207780, fax. 220.76.95, înregistrata la Registrul Comertului sub nr. J40/189/14.01.1997, cod fiscal R 3324060, reprezentat prin DIRECTOR GENERAL Dr. Sidoroff Elisabeta Manuela si DIRECTOR ECONOMIC Ec. Vladimir Sandru
Director Proiect: CS I - Dr. Luminita Tcacenco, e-mail : tcacenco_lumi@yahoo.com
Partener I:
Centrul de Biotehnologii Microbiene – Biotehgen cu sediul in Bucuresti, sector 1, str. Marasti, nr. 59, cod postal 011464, tel. 021. 224.2576/269; fax: 021 – 224.2815, email:jstefana@yahoo.com, cu nr. Inregistrare 377/21.02.2002, cont IBAN RO 28RNCB nr. 5018000025610001 deschis la BCR Ag.WTC, cod fiscal R 146906, reprezentat prin Director General Prof. Univ. Stefana Jurcoane si Contabil Sef, Ec. Sandu Constanta – responsabil stiintific Prof. Univ. Stefana Jurcoane,
Partener II :
S.C. HOFIGAL EXPORT – IMPORT SA, str. Intrarea Serelor, nr. 2, sector 4, Bucuresti, cod postal 042124, tel: 021 – 3345135; 021-3348628; fax: 021-3345905; email:hofigal@yahoo.com; cont IBAN: RO56 RNCB101000207110001, deschis la BCR –sucursala Unirea, CUI R 384530, inregistrat la Registrul Comertului J40/10817/1991, reprezentata prin Director General Dr. Ing. Stefan Manea, Director Economic Ec. Elena Biziru, responsabil stiintific – Prof. Dr. Viorica Tamas
Partener III:
UNIVERSITATEA de STIINTE AGRONOMICE si MEDICINA VETERINARA Bucuresti, str. Blv. Marasti nr. 59, sector 1, cod postal 011464, tel: 021-2242576/376; mobil 0721361204; fax: 021 224 2815; email:ialecu@info.usamv.ro;lirina@xnet.ro; cu nr. Inregistrare HG 223/2005, cont RO 08TRZ7015003XXX000058, deschis la Trezoreria sector 1, cod fiscal 4602041, reprezentat prin Rector Prof. Dr. Ioan Nicolae Alecu, Contabil Sef, Ec. Ileana Bragadireanu, responsabil stiintific – lector drd. Irina Lupescu,
Biotehnologiile participa la actuala revolutie tehnologica intr-o masura foarte importanta. Achizitie rapida de cunostinte stiintifice in biologie si cuplajul cu robotica si informatica, concentrarea societatilor bioindustriale antreneaza o bulversare a conditiilor socio-economice mondiale, in special in domeniile agriculturii si alimentatiei, sanatatii si a mediului.
Biotehnologiile sterg demarcatia intre cercetarea fundamentala si cercetarea aplicativa; linia de separare intre cercetarea publica si cercetarea privata. Mai mult, pe plan mondial se remarca o tendinta de concentrare a eforturilor pentru eficientizarea cercetarii.
La sesiunea OMS din 2004 de la Copenhaga au fost adoptate rezolutii cu referire la supravegherea si controlul unor boli netransmisibile, printre care si obezitatea.
Este cunoscut faptul ca alimentatia inadecvata bazata in principal pe biopreparate exclusiv prelucrate de tip “fast food” ce au luat o amploare mare si in Romania, asociata si cu alti numerosi factori, cum ar fi stresul zilnic, lipsa de miscare, conduc la obezitate, o boala care genereaza afectiuni complexe ale organismului. Aceasta maladie este cauzata de disfunctiile ce apar in cadrul metabolismului lipidic.
Biosinteza lipidelor este un proces metabolic important in majoritatea organismelor. Datorita capacitatii limitate a animalelor superioare de a depozita polizaharide, glucoza, ingerata in exces fata de necesitatile energetice imediate si fata de capacitatea de depozitare este transformata prin glicoliza in piruvat si apoi in acetil CoA, din care sunt sintetizati acizii grasi, care la rindul lor sunt convertiti in triacilgliceroli cu un continut energetic mult mai ridicat decat polizaharidele. Acestia pot fi depozitati in cantitati foarte mari in tesuturile adipoase ale mamiferelor dar si in semintele si fructele multor plante. Lipidele compun diversele fosfolipide si sfingolipide, sunt supuse in majoritatea celulelor unui turnover metabolic continuu in prezenta unui complex de enzime. Acizii linoleic si linolenic, care sunt acizi grasi esentiali, sunt sintetizati de plante dar nu si de mamifere care au nevoie de prezenta lor in hrana.
Tratarea obezitatii se face in prezent prin mijloace diverse.
In SUA, unde aceasta boala este foarte raspindita; (unul din zece oameni sufera de aceasta afectiune), exista clinici specializate in tratarea obezitatii prin diete severe-Mayo, prin interventii chirurgicale si prin tratamente preventive ce se aplica in special copiilor proveniti din parinti cu aceasta afectiune. Aceste tratamente sunt insa deosebit de costisitoare si neaccesibile marii majoritati a polpulatiei.
Pe piata europeana exista o multime de produse suplimente nutritive care pe langa proprietatile antioxidante prezinta indicatii si in aceasta afectiune. Amintim printre acestea: lipostabil (Rhone, Paulene, Rorer).
Pe piata romaneasca au aparut pe langa produsele de import si produse indigene: TISOFIT-afine, catina, macese.
Produsul ce va fi elaborat in cadrul acestui proiect spre deosebire de altele de pe piata va avea un potential biologic activ mult mai ridicat si deci mai eficient in reducerea lipidemiei.
De asemenea prezinta si un grad de noutate prin faptul ca va fi un biocomplex nutritiv ce combina lipaza obtinuta prin biosinteza din fungi cu lipaza obtinuta din extracte vegetale autohtone.
Proiectul isi propune realizarea si diversificarea gamei de bioproduse destinate mentinerii sanatatii urmarind rezolvarea problemelor esentiale legate de ameliorarea, prevenirea sau vindecarea afectiunilor complexe generate de obezitate, in conexiune cu situatia actuala pe plan national si international, proiectul isi propune sa rezolve o parte din obiectivele programului, prin:
OBIECTIVELE GENERALE:
Ø Largirea cunostintelor privind obtinerea, purificarea caracterizarea si valorificarea de noi produsi cu activitate lipolitica (2005)
Ø Obtinerea si caracterizarea prin determinari specifice a bioproduselor cu activitate lipolitica din diferite surse vegetale (2006)
Ø Stabilirea parametrilor fizico-chimici si biologici de obtinere a lipazei prin biosinteza cu tulpini de microorganisme (2006)
Ø Izolarea, conditionarea si caracterizarea lipazei obtinute prin biosinteza (2007)
Ø Studii privind formularea farmaceutica a unui nou bioprodus cu activitate lipolitica superioara prin asocierea componentelor biologice de origine vegetala si biosinteza obtinute (2007)
Ø Studii privind conditionarea biopreparatului obtinut pentru mentinerea activitatii biologice (2008)
Ø Studii preclinice privind testarea biocompatibilitatii si a eficientei biopreparatului cu activitate lipolitica pe model celular (2008)
OBIECTIVE SPECIFICE:
Ø Obtinerea si purificarea proteinelor vegetale cu activitate lipolitica,
Ø Obtinerea prin biosinteza din microorgamisme inalt producatoare a lipazei
Ø Evaluarea activitatii lipolitice a preparatului obtinut din sursa vegetala si biosinteza
Ø Realizarea unei formule farmaceutice pentru utilizarea bioprodusului cu activitate lipolitica superioara in tratamentul obezitatii
Ø Dezvoltarea unor baze de cercetare prin achizitionarea echipamentelor specifice necesare pentru asigurarea unui nivel inalt tehnic comparativ cu cel european.
OBIECTIVELE MASURABILE:
Stabilirea unor protocoale privind:
Ø obtinerea si izolarea lipazei din surse vegetale si asigurarea optimizarii biotehnologiei si a reproductibilitatii experimentelor;
Ø obtinerea si izolarea lipazei prin biosinteza cu microorganism inalt producator;
Ø caracterizarea fizico-chimica si biochimica a produselor cu activitate lipolitica din sursa vegatala si prin biosinteza
Ø conditionarea preparatului complex obtinut pentru mentinerea activitatii biologice
Ø evidentierea efectelor biopreparatului lipolitic asupra modelului celular ales
Stabilirea formulei farmaceutice a biopreparatului complex din surse vegetale prin biosinteza.
Publicarea rezultatelor experimentelor in publicatii nationale si internationale de prestigiu.
Comunicarea de lucrari originale la manifestari stiintifice in domeniu.
Elaborarea unei cereri de brevet pentru rezultatele originale obtinute in cadrul proiectului.
Realizarea de colaborari cu specialisti in domenii adiacente din institute de profil din tara si strainatate.
Formarea de personal inalt calificat in domeniul biotehnologiei prin efectuare de lucrari de licenta, master a studentilor din profil.
Obiectivele propuse sunt in conformitate cu obiectivele generale ale Programului Cercetare de Excelenta, Modul 1-Proiecte de C-D complexe prin:
Concentrarea si valorificarea optima a potentialului stiintific si tehnologic de inalt nivel existent in Romania in domeniul Stiintelor Vietii pentru stimularea si sprijinirea inovarii in directia realizarii de noi bioproduse. Accelerarea procesului de aliniere si integrare tehnologica a agentilor economici conform centrelor si reglementarilor UE prin premise de cercetare ce vor permite obtinerea de bioproduse originale romanesti destinate mentinerii starii de sanatate.
Cresterea calitatii activitatii unitatii si institutiilor de C-D din Romania care sa asigure atragerea, dezvoltarea si concentrarea de resurse umane si materiale pentru introducerea unei noi game de bioproduse destinate reducerii consecintelor datorate excesului supraponderal.
Toate obiectivele inscrise includ activitati cu caracter de noutate atat sub aspectul procesarii, dezvoltarii activitatilor, cat si a realizarii metodelor.
Pornind de la experienta partenerilor implicati in realizarea proiectului se utilizeaza tehnici si metode moderne, avand ca suport baza echipamentelor deja existente in colectivele implicate, si mentionata in lista de echipamente solicitate in documentele aferente propunerii de proiect.
Studiile privind determinarea efectului biopreparatului se efectueaza pe modele celulare si animale utilizand tehnica citometriei in flux cu aparat FACScan–BECTON DICKINSON, microscopie optica (Microscop cu prelucrare imagine) si microscopie electronica (Microscop Philips).
Lucrari stiintifice publicate in cadrul proiectului:
1.Sasarman Elena, Diguta Camelia, Jurcoane Stefana, Lupescu Irina, Groposila Constantinescu Diana, Tcacenco Luminita, Influence of some nutritional factors on lipase production by Yarrowia Lipolytica, Romanian Biotehnological Letters, vol.12, nr. 6, 2007, pp 3483-3488, ISSN 1224-5984
2. Irina Lupescu, Diana Goposila-Constantinescu, Stefana Jurcoane, Camelia Diguta, Andreea Cozea, Luminita Tcacenco, Production of lipase by a strain of the non-conventional yeast Yarrovia lipolytica and isolation of crude enzyme, Romanian Biotehnological Letters, vol.1-2, nr. 3, 2007, ISSN 1224-5984.
3. Jurcoane S., Tcacenco L., Dinu I., Lupescu I., Sasarman E., Diguta C., Pomponiu D., Berteanu E., Botezatu A., - Studiul privind selectarea de tulpini inalt producatoare de enzime lipolitice, Simpozionul “Realizari in cercetarea stiintifica din biotehnologie obtinute prin Programul CEEX - Modulul 1, BIOTECH 2007”- Iasi, 30.05 - 1.06.2007.
4. Tcacenco L., Tamas V., Ionescu D., R. Botezatu, Pomponiu D., Berteanu E. Phytotherapeutic products with lipolytic activity in local flora - Simpozionul: “Plante medicinale prezent si perspective” organizat de: Centrul de Cercetari Biologice Stejarul Piatra Neamt si S. C. Centrul de Cercetare si Prelucrare Plante Medicinale Plantavorel S. A. Piatra Neamt, Editia a –X- a, Piatra Neamt, 6-8 iunie 2007.
5. .Tcacenco L., Tamas V., Ionescu D., R. Botezatu, Pomponiu D., Berteanu E.,Bioproduse fitoterapeutice cu activitate lipolitica din flora indigena - Conferinta cu Participare Internationala “Agricultura si industria in contextul integrarii europene” Universitatea “Lucian Blaga”, Facultatea de Stiinte Agricole, Industrie Alimentara si Protectia Mediului, Sibiu, 26-28 aprilie 2007.
CERERE BREVET DE INVENTIE:
PROCEDEU DE OBŢINERE A LIPAZEI CU O TULPINĂ DE Yarrowia lipolytica – cerere de brevet de inventie nr. A/001 178/08.03.2007, Autori:JURCOANE STEFANA, LUPESCU IRINA, TCACENCO LUMINITA, GROPOSILA-CONSTANTINESCU SIANA-GABRIELA, DIGUTA FILOFTEIA CAMELIA, COZEA ANDREEA, PELINESCU DIANA, SASARMAN ELENA